gst-hai-1融合蛋白的表达及抗人hai-1单克隆抗体的制备

制备抗人肝细胞生长因子激活物抑制因子（hai-1）单克隆抗体，为对hai-1进行进一步的研究打下基础。将人hai-1cdna分段克隆，构建gst-hai-1融合蛋白原核表达载体，转化大肠杆菌后加iptg诱导融合蛋白表达，经制备型sds-page法分离表达的gst-hai-1融合蛋白，通过割胶、电洗脱回收融合蛋白，并以此为抗原免疫balb/c小鼠，应用细胞融合技术制备产生抗人hai-1单克隆抗体的杂交瘤，以elisa、westernblot和免疫组织化学染色进行鉴定。最终获得抗人hai-1单克隆抗体杂交瘤细胞株zmc6，产生的单克隆抗体可特异性地与表达的gst-hai-1融合蛋白反应，并可识别大肠组织中的膜型及脱落型hai-1蛋白。该单克隆抗体的制备成功，为深入研究hai-1的功能提供了有力工具。