抗cea免疫毒素的表达、纯化、复性与生物学活性的研究

以抗癌胚抗原（carcinoembryonicantigen,cea）单链抗体与假单胞菌外毒素（pseudomonasexotoxina,pea）的截短和修饰形式pe38/kdel构建重组免疫毒素cea/pe38/kdel，并在大肠杆菌菌株bl21(de3)-star中表达。采用镍离子螯合层析法纯化变性的包涵体样品，并用连续梯度透析的方法对纯化后的包涵体进行复性。采用流式细胞术鉴定复性产物与靶细胞的结合活性，结果表明免疫毒素cea/pe38/kdel具有与靶细胞特异性结合的活性。以mtt法检测免疫毒素对肿瘤细胞的体外杀伤活性,结果表明该免疫毒素对sw1116和cne_2细胞具有特异性杀伤活性。证明了经包涵体复性的抗cea免疫毒素cea/pe38/kdel对表达cea抗原的肿瘤细胞具有良好的结合和杀伤活性。