wavetm生物反应器灌注培养生产种子细胞的开发和应用

近年来，国内中国仓鼠卵巢细胞(chinesehamsterovary，cho)生产罐的培养规模已达上千升，国外已达上万升，最终的生产罐前需要多级摇瓶、种子罐进行种子细胞扩增，扩增效率较低，严重影响了抗体、融合蛋白等生物制品的生产效率。文中利用wavetm波浪式生物反应器，通过灌注培养的方法，成功地实现了种子细胞的高效扩增。wavetm波浪式生物反应器灌注培养方法制备种子细胞，cho细胞密度高达2.28×107cells/ml时仍处于指数生长期且细胞活力大于95％，以此细胞作为种子细胞，4×105cells/ml接种于另一个wavetm生物反应器进行流加培养，最大活细胞密度仍可达1.73×107cells/ml。通过此种扩增方式，1台wavetm20/50即可为1000l或2000l的生产罐提供种子细胞，种子细胞的扩增倍数(splitratio)可以达到1∶50~1∶100倍，与传统不锈钢罐种子细胞扩增倍数1∶2~1∶10相比，可以显著减少2~3级种子罐，种子细胞的扩增时间减少7~9d，极大地提高生产效率。