长效人促卵泡激素cho细胞株的构建及其体内活性

促卵泡激素(fsh)是具有促进卵泡与睾丸发育作用的一种垂体糖蛋白激素。因其体内半衰期较短，临床上需要连续10d以上每天注射，病人使用非常不方便。本文旨在通过提高糖基化程度，研制一种长效fsh。通过一段含有两个n-糖基化位点的连接序列,将人fshα链与β链cdna融合，并插入pcdna3.1(+)表达载体。表达载体转染cho-k1细胞后，通过g418筛选得到阳性单克隆细胞，并经pcr和westernblotting证实。该重组fsh为单链蛋白，分子量约为49kda。经无血清培养，工程细胞株培养上清液中重组fsh的表达量可达3mg/l。单次注射该重组fsh能够促进大鼠卵巢发育与卵泡成熟，且药效与连续8次注射folltropin-v的相近。实验结果显示，本研究已成功获得一种长效重组fsh。