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生物工程学报 2014
mir373和mir542-5p调控肠道病毒71型在人横纹肌肉瘤细胞中的复制DOI: 10.13345/j.cjb.130555, PP. 943-953 Keywords: mirnas,肠道病毒71型,人横纹肌肉瘤细胞,病毒复制 Abstract: 研究发现micrornas(mirnas)可以参与调控病毒在宿主细胞内感染和复制的过程。为了揭示mirnas是否参与肠道病毒71型(enterovirus71,ev71)的感染与复制,研究了mirnas对ev71病毒在宿主细胞内复制的影响。构建mirnas靶基因筛选系统,在双荧光素酶报告体系的pmir载体插入病毒基因,如果插入的基因序列能被细胞内的mirnas靶向调控,报告基因的表达将发生变化。实验发现ev71病毒5′-utr基因可能是mirnas的作用靶标。随后利用mirnas在线分析软件预测并验证可能作用于5′-utr基因片段的mirnas。为了研究mirnas分子对5′-utr基因的调控作用是否可以体现在ev71病毒的复制过程中,在人横纹肌肉瘤(rhabdomyosarcoma,rd)细胞中转染mirnasmimics,利用westernblotting和real-timepcr实验检验ev71病毒的复制和表达情况。实验结果表明,mir373和mir542-5p可以通过作用于ev71病毒5′-utr基因从而抑制病毒在rd细胞中的复制和表达。细胞内mir373和mir542-5p可以调控ev71在宿主细胞中的复制过程。研究ev71病毒与宿主mirnas的相互作用机制为进一步阐明ev71病毒感染与复制机理奠定了基础。
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