黄杆菌肝素酶ⅱ重组菌培养条件的优化及高密度发酵

黄杆菌肝素酶ⅱ(hepⅱ)是一类可特异性切割肝素、乙酰肝素类分子内连接键的酶。文中对黄杆菌肝素酶ⅱ重组菌的诱导时机、诱导剂添加量、诱导温度、诱导时间等诱导产酶条件进行优化。经过优化最佳摇瓶发酵产酶条件为：37℃培养重组菌至对数生长前期，添加诱导剂iptg至终浓度为0.3g/l，20℃下诱导10h，酶活达到最高，为570u/l。在此基础上通过发酵罐高密度培养手段将菌体浓度od600进一步提高到98，酶活大幅度提高到9436u/l，该研究结果为hepⅱ的工业化生产与应用奠定了良好的基础。