转popw基因烟草的构建及相关表型分析

popw是克隆于青枯劳尔氏菌ralstoniasolanacearumzj3721中的一种新的编码harpin蛋白的基因，原核表达的popw蛋白能够诱导烟草对tmv的抗性、促进烟草生长、提高烟草品质。将popw基因连接到植物表达载体pbi121上，构建成重组转基因载体pb-popw，通过冻融法转化根癌土壤杆菌eha105，获得阳性转化子。再采用叶盘法转化三生烟nicotianatobacumcv.xanthinc.，经卡那霉素抗性筛选、pcr检测、rt-pcr分析获得21个株系的t3代阳性植株。pcr及rt-pcr检测结果表明popw基因已经整合到烟草基因组中，并在转录水平正常表达。gus染色进一步证明popw基因在翻译水平上进行了表达，且不同株系之间表达存在差异。对烟草花叶病毒(tmv)的抗病性测定结果表明，转基因烟草对tmv的抗病性增强，防效最高达54.25%。转基因烟草在生长上也具有一定优势，生长15d的根长最高为野生型的1.7倍，移栽后60d的株高、鲜重、干重最高分别为野生型烟草的1.4、1.7和1.8倍。