产芳香腈水解酶的恶臭假单胞菌pseudomonasputidacgmcc3830的筛选、鉴定及发酵优化

近年来微生物腈水解酶水解腈类化合物制备有机酸已逐步受到关注。本研究分离到一株表现出较高腈水解酶活力的细菌菌株，通过形态学、生理生化实验以及16srrna基因序列分析将其鉴定为恶臭假单胞菌pseudomonasputidacgmcc3830。结合单因素及响应面法对该菌株产腈水解酶的发酵条件进行了优化，获得最适培养条件为：甘油13.54g/l，胰蛋白胨11.59g/l，酵母粉5.21g/l，kh2po41g/l，nacl1g/l，脲1g/l，初始ph6.0及培养温度30℃。通过优化，酶活由2.02u/ml提升至36.12u/ml。对该菌株底物特异性的考察结果表明，恶臭假单胞菌腈水解酶对芳香族腈类化合物具有较高的水解活力。将其应用于烟酸的生物合成中，2mg/ml游离细胞能90min内将20.8g/l3-氰基吡啶彻底转化，制备得到相应烟酸。这些结果表明恶臭假单胞菌p.putidacgmcc3830在烟酸的规模化生产中具有一定的应用潜力。