ibdv丝素蛋白/壳聚糖dna微球疫苗的制备及免疫原性分析

为了制备传染性法氏囊病病毒(infectiousbursaldiseasevirus,ibdv)dna微球疫苗，并评价其免疫效果。以丝素蛋白(silkfibroin,sf)/壳聚糖(chitosan,cs)为壁材，ibdv的vp2/4/3dna疫苗为芯材，通过戊二醛和na2so4介导的乳化交联技术，制备出sf/cs复合微球疫苗，然后经肌肉注射14日龄非免疫鸡，2周后加强免疫一次，酶联免疫法(elisa)定期监测鸡血清的ibdv抗体，以研究微球化疫苗的免疫原性。结果显示：戊二醛介导交联方法影响荷载dna疫苗的活性，而na2so4介导的交联方法操作简单且不影响荷载dna活性；建立了以壳聚糖浓度0.5%(ph5.0)、丝素蛋白浓度0.6%，质粒dna500μg/ml溶解在2%na2so4溶液中的工作条件；sf-cs复合微球dna疫苗荷载率89.14%，大小1.98μm，对dnaseⅰ的消化有保护作用。免疫后的抗ibdv血清elisa抗体的检测显示，微球免疫组总体高于质粒疫苗免疫组(p<0.05)，而且sf/cs复合微球组免疫反应要略高于单纯cs包被的抗原组。研究表明，丝素蛋白/壳聚糖作为微球佐剂能提高ibdvdna疫苗的临床免疫效果，有很好的应用前景。