过表达mir-155抑制c2c12成肌分化

为明确mir-155在c2c12成肌分化中的作用及分子机制，本研究构建了mir-155过表达腺病毒载体，运用过表达mir-155的腺病毒感染c2c12，并诱导其成肌分化。通过形态学观察，成肌标志基因mrna和蛋白表达水平的检测，以及双荧光素酶报告基因系统对预测的mir-155靶基因(tcf4)的验证，结果表明，c2c12细胞分化中，过表达mir-155明显降低了肌管的形成，成肌标志基因myog和myhc的mrna表达量极显著地下降(p<0.01)，而myod差异不显著(p>0.05)，成肌标志基因蛋白检测结果与mrna检测结果一致；进一步研究显示mir-155与预测的tcf4基因的3'utr3个靶点(1487-1493,1516-1522,4532-4583)中的1个(4532-4538)结合，并发现过表达mir-155显著降低了tcf4的mrna水平(p<0.05)。表明mir-155可能通过靶向tcf4抑制c2c12成肌分化。