大黄鱼三种病原弧菌外膜蛋白交叉保护性抗原筛选

弧菌是海水养殖环境中常见的条件性致病菌，弧菌病的暴发给水产养殖业造成了严重损失。鉴于水生动物尤其是鱼类弧菌病的发生常常是多种(血清型或亚种)弧菌的混合感染，筛选具有潜在的交叉保护性蛋白抗原，作为制备多价疫苗或联合疫苗的侯选成分具有重要意义。文中从患病大黄鱼中分离到8株弧菌，经生理生化和分子生物学鉴定分别为6株哈维氏弧菌vibrioharveyi，1株溶藻弧菌vibrioalginolyticus和1株副溶血弧菌vibrioparahaemolyticus。选择典型的不同种的弧菌为代表，提取其外膜蛋白，经sds-page和westernblotting分析，确定它们大约在45kda、35kda、22kda处出现了3条共同的免疫印迹条带，表明它们很有可能含有共同的能够彼此交叉保护的抗原。利用双向电泳和免疫印迹相结合的方法，借助于maldi-tof-ms质谱分析技术，发现溶藻弧菌v.alginolyticus的一种功能未知的孔蛋白(porin,genbankaccessionno.zp_01260407)和副溶血弧菌v.parahaemolyticus的一种麦芽糖孔蛋白的前体蛋白(maltoporinprecursor，genbankaccessionno.np_801154)能够和哈维氏弧菌v.harveyi全菌多抗产生免疫反应，表明这两种蛋白可以作为3种弧菌的交叉保护性抗原，以此制备的疫苗可望对3种弧菌的感染产生交叉保护作用。