转哺乳动物cyp2e1基因烟草植株再生及其分析

哺乳动物肝细胞中cyp2e1基因所编码的蛋白cyp2e1在代谢异型有机物方面起着重要作用，转cyp2e1基因植物可以代谢多种小分子有机污染物；但cyp2e1基因在植物体内的表达调控和代谢机理尚不完全清楚。文中将含有cyp2e1基因的质粒psld50-6和对照gus基因的质粒pkh200转入根癌农杆菌gv3101，利用根癌农杆菌转基因技术将cyp2e1基因和对照gus基因成功转入烟草，分别获得了转cyp2e1和gus基因再生植株。选取pcr鉴定的再生植株进行荧光定量pcr(qrt-pcr)分析，结果表明：在转录水平上，转cyp2e1基因烟草中，乙醇处理后cyp2e1基因的表达明显下降，苯和甲苯处理后cyp2e1基因的表达量稍有下降；而丙酮、甲醛处理和缺氧条件下cyp2e1基因的表达有不同程度的升高。此外，苯处理后，转cyp2e1基因烟草中nadph-p450氧化还原酶和细胞色素b5酶的基因活性显著提高，说明烟草中nadph-p450氧化还原酶和细胞色素b5酶与cyp2e1酶的解毒过程有关，可能起到哺乳动物体内的nadph-p450氧化还原酶和细胞色素b5的功能，参与cyp2e1酶催化过程的电子传递链。