猪sall4b基因的克隆及表达分析

sall4基因是sall基因家族的一个成员，在胚胎发育、器官形成和干细胞多能性的维持以及重建中都起到重要作用，有sall4a和sall4b两种剪切突变体类型。目前猪的sall4基因序列尚未获得。鉴于其在多能性细胞调控中的作用，对猪的sall4基因进行了克隆测序，并对其在各组织及胚胎中的表达进行了初步研究。通过5￠和3￠race克隆得到猪sall4基因cdna全长序列(2372bp)，序列分析证明此基因编码的蛋白结构更接近于小鼠和人sall4b亚型，同源性可达70％~80％，而与其他物种的sall4a相比则缺少一段含锌指结构域的片段，同源性降至30％~55％。real-timepcr证明猪sall4b基因广泛表达于猪的各种器官，其中除卵巢组织呈高量表达之外，脾、肺、心和睾丸表达量也相对较高；在早期胚胎发育过程中除4-细胞阶段相对表达量较低，其他阶段呈高量表达。免疫荧光跟踪sall4在猪早期胚胎中的表达情况发现sall4在着床前胚胎中全程表达并定位于细胞核中，在囊胚阶段基因表达趋向于定位在内细胞团中。表达分析证明sall4b基因与多能性紧密相关，预示着猪sall4b基因将可能作为新的重编程因子用于诱导猪多能干细胞的体系中。