重组人隐花色素蛋白ι的表达纯化及其在制备放疗保护剂中的应用

放疗是治疗肿瘤的最常用手段之一，为寻找能够保护肿瘤组织周边正常细胞的放疗保护剂，通过原核表达质粒的构建，利用大肠杆菌bl21(de3)诱导并成功表达出人隐花色素蛋白ⅰ(hcry1)。采用包涵体溶解、梯度透析复性、镍柱亲和纯化以及超滤浓缩的蛋白纯化工艺，1l菌液可收获10?15mg纯度超过95%的hcry1。在hacat细胞中通过细胞dna损伤修复中所产生的h2a.xfoci荧光强度的定量检测，验证了纯化所得的hcry1具有射线损伤防护功能；通过对经过hcry1以及对照蛋白处理后的细胞凋亡情况的检测排除了hcry1的毒副作用对h2a.xfoci荧光强度的影响。这些为进一步研究hcry1提供了便利条件，也为将hcry1开发成为新的放疗保护剂提供了理论基础。