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生物工程学报 2012
蛋白含量检测的抗干扰新方法, PP. 1130-1138 Keywords: 蛋白质定量,干扰物质,表面活性剂,螯合剂,还原剂,含氮化合物,耐受性 Abstract: 为提高蛋白质含量检测方法的抗干扰能力,从福林酚试剂法入手,以牛血清白蛋白为标准样品,重新设计制定实验试剂组成与配比等,获得蛋白质含量检测新方法,然后探讨新方法的适用检测波长范围和稳定性,并利用细胞全蛋白裂解液分析它对多种常见干扰物质的包容性。实验发现,新方法不仅能准确检测蛋白质含量,对蛋白质测定液中表面活性剂的耐受浓度,如十二烷基硫酸钠(sds)、np-40和tritonx-100分别达到10%、2%和1%;螯合剂乙二胺四乙酸二钠盐(edta)和ethyleneglycolbis(2-aminoethyl)tetraaceticacid(egta)则分别达25mmol/l和1mmol/l;对还原剂二硫苏糖醇(dtt)和β-me的包容浓度均为1mmol/l;而含氮化合物硫酸铵与尿素则分别为0.5mol/l和4mol/l。与原方法相比较,对常见干扰物质的耐受性有显著提高,说明新方法适用含多种干扰物质的蛋白质溶液,在生命科学研究领域具有广泛应用前景。
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