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ISSN: 2333-9721
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利用杆状病毒载体在棉铃虫血细胞中表达大肠杆菌β-半乳糖苷酶

Keywords: 杆状病毒载体,棉铃虫血细胞,β-半乳糖苷酶,基因表达

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Abstract:

用携带大肠杆菌β-半乳糖苷酶基因的杆状病毒转移载体pac36o-b-gal与野生型的苜蓿丫纹夜蛾(acnpv)dna同时转染草地夜蛾细胞,经x—gal筛选和空斑纯化得到重组型杆状病毒acnpv-β-gal。该重组病毒能有效地感染棉铃虫血细胞系,并高效表达出受acnpv多角体蛋白启动子控制的、具有生物活性的外源基因产物--β-半裂糖苷酶。80%以上的酶蛋白能分泌到细胞外,培养液中酶活可达每毫升50000单位以上,约相当于170μg酶蛋白。用要sds-聚丙烯酰胺凝胶电泳分离表达产物和β-半乳糖苷酶在凝胶上的特异性显色反应分析,重组病毒在棉铃虫血细胞中表达的acnpv多角体蛋白--大肠杆菌β-半乳糖苷酶融合蛋白是以5种活性的多聚体或复合物形式存在的。

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