高温反向顺序测定

单链克隆dna的反向测序是一个简单和快速的方法，这个方法可利用原来的dna再进行反向顺序测定，从而达到校正和积累dna数据的作用。由于反向测序的本质是双链测序，所得到的dna顺序的图谱背景较深，伴有杂带，或在x光显影上是不清晰的。本文报道利用我们实验室所开发的热稳定性的bst聚台酶系统，进行反向测序克服了这些缺点，获得的图谱可以和单链dna模板测序的图谱相媲美。我们以nodd487-mp8ss-dna为模板进行反向测序，证明bst聚合酶在65℃反应能得到满意的结果。