麦迪霉素4〃酰化酶基因的克隆及在螺旋霉产生菌中的表达

从含麦迪霉素生物合成基因⑴的初级克隆pcn6c5中，发现并分离了麦迪霉素4〃酰化酶基因，与质粒载体plj680相连，获得重组质粒p66b，在螺旋霉素产生菌中得到表达，其主要产物为4〃异戍酰螺旋霉素。以p66bdnabamhi—bamhi2．3kb插入片段为探针，从麦迪霉素产生菌基因文库中获得了另一阳性克隆pcnlof5，southern分子杂交确定pcnlof5bamhi—bamm8．okb为同源片段。以pwhm3及pjj680为载体，获得重组质粒pwf5及p6f5，分子大小分别为15．2kb及13．3kb。通过dna转化，并经分子杂交实验证明，获得含重组质粒的螺旋霉素产生菌克隆菌株。其主要产物经分离、纯化后，分析其理化性质和光谱数据，鉴定为丙酰螺旋霉素ⅲ和ⅱ。研究还表明，麦迪霉素基因文库中只有pcnl0f5dna与碳霉素产生菌的4〃异戊酰化酶基因同源，提示pcn6c5克隆携带的麦迪霉素4〃酰化酶基因与pcnlof5的4〃丙酰化酶基因及碳霉素4〃异戊酰化酶基因有一定的区别。