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生物工程学报 2009
外源glna基因干扰大肠杆菌的代谢, PP. 626-631 Keywords: 谷氨酰胺合成酶,毛细管电泳,荧光定量rt-pcr,sds-聚丙烯酰胺凝胶电泳 Abstract: 采用分子生物学的方法构建了含bacillussubtilisglna基因的重组菌株escherichiacolidh5a(pmd19-glna),用毛细管电泳和核磁共振对重组菌株的转化谷氨酸的产物进行定性鉴定,并进一步通过荧光定量rt-pcr测定谷氨酰胺合成酶基因(glna)mrna水平的相对表达量,最后用sds-聚丙烯酰胺凝胶电泳对蛋白的相对表达情况进行了分析。结果表明重组菌株并没有增加谷氨酰胺的产量,而是明显增加了g-氨基丁酸(gaba)的产量。实验表明重组菌株中的glna基因可以正常转录,但是谷氨酰胺合成酶的蛋白表达量并没有增加。这种外源基因干扰大肠杆菌代谢的现象值得进一步研究。
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