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ISSN: 2333-9721
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中国林蛙皮肤抗菌肽基因的cdna克隆及抗菌、抗癌和溶血活性的测定

, PP. 101-108

Keywords: 中国林蛙,cdna克隆,序列分析,抗菌活性,抗癌活性

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Abstract:

采用rt-pcr和3¢race方法,从中国林蛙皮肤总rna中克隆出了6条编码不同抗菌肽前体的cdna序列,分别命名为:preprotemporin-1cea、preprotemporin-1ceb、preprotemporin-1cec、preprobrevinin-1cea、preprobrevinin-1ceb和preprochensinin-1。cdna碱基序列全长为289~315bp,编码59~65个氨基酸。6个抗菌肽前体由3部分结构域组成:22个氨基酸残基组成的信号肽、多个酸性氨基酸残基组成的中间序列、高度变异的成熟肽。preprotemporin-1cea、preprotemporin-1ceb和preprotemporin-1cec属于temporin-1家族抗菌肽前体,具有肽链短,c-端酰胺化的特点;preprobrevinin-1ceb和preprobrevinin-1cea属于brevinin-1家族抗菌肽前体,在肽链的c-端含有rana盒结构,可在2个半胱氨酸残基间形成二硫键,组成7肽环;preprochensinin-1在已知多种数据库中没有发现序列同源的多肽,被鉴定为新抗菌肽。人工合成temporin-1cea、temporin-1ceb、brevinin-1cea和chensinin-1四种中国林蛙皮肤抗菌肽,活性检测结果表明:它们对金黄葡萄球菌等3种革兰氏阳性细菌的生长具有明显抑制作用,同时抑制乳腺癌mcf-7细胞和宫颈癌hela细胞生长。

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