fmdv非结构蛋白2c主要表位区与3ab基因的组合表达与活性分析

近年的研究表明,口蹄疫病毒(fmdv)非结构蛋白(nsp)2c在区分灭活疫苗免疫动物与自然感染动物方面具有潜在的价值,为了建立敏感性更高的鉴别诊断方法,将截取了2c蛋白n-端和c-端的主要b细胞表位区和完整3ab蛋白基因组合后,进行了原核表达,得到了分子量约为47.6kd的目的蛋白2c￠3ab。通过westernblotting分析证明,表达产物能被fmdv感染动物阳性血清识别,具有很好的反应性。以通过电泳纯化的目的蛋白作抗原进行间接elisa检测不同来源的动物血清,结果表明,该抗原仅与感染动物血清具有很好的反应活性,而与健康动物与免疫动物血清无反应,说明重组蛋白2c￠3ab可作为区分灭活疫苗免疫动物与感染动物的鉴别诊断抗原。用2c￠3ab和3abc为抗原进行间接elisa,对比检测田间血清样品,结果显示2c￠3ab-elisa敏感性比3abc-elisa高。说明以重组蛋白2c￠3ab作为鉴别诊断抗原,能进一步提高对临界值血清的检出率,这对区分灭活疫苗免疫动物与fmdv隐性感染动物与带毒动物具有非常重要的意义。