牛脂肪间充质干细胞的分离、培养与鉴定

为了给组织工程提供种子细胞，对牛间充质干细胞(adipose-derivedstemcells，adscs)进行体外分离培养。首先应用胶原酶消化法分离牛adscs，进行体外培养、连续传代，并观察细胞的形态变化，通过细胞计数绘制生长曲线，细胞压片进行染色体分析，采用细胞免疫荧光化学方法检测细胞表面标记，利用成骨分化和成脂分化检测其分化能力。结果显示牛adscs体外培养时细胞形态呈成纤维细胞样，增殖稳定；vimentin、cd49d、cd13表达呈阳性，cd34表达呈阴性；成骨诱导条件下的细胞碱性磷酸酶活性高，茜素红染色呈阳性；成脂诱导条件下细胞周围脂滴明显，油红-o染色呈阳性。结果证明牛adscs体外生长稳定、增殖速度快、定向分化能力强，简易的体外分离培养及诱导方法为其在组织工程中的应用奠定了基础。