fta滤膜用于pcr检测肉中的金黄色葡萄球菌

利用fta滤膜,采用pcr技术可直接检测肉及肉制品中的金黄色葡萄球菌，无需增菌，灵敏度高。在采用浮选与溶剂萃取相结合方法的基础上，使用fta膜可高效地从鲜肉中提取金黄色葡萄球菌的dna,消除pcr反应的抑制因子。以金黄色葡萄球菌耐热核酸酶基因（nuc）为靶基因，经过pcr扩增得到279bp的产物。经过dna测序证实该产物为目的扩增产物。使用fta滤膜处理样品，再通过pcr方法检测金黄色葡萄球菌，猪肉、牛肉、羊肉、鸡肉匀浆液的检出限均为10cfu/ml，可在6h内完成对肉中金黄色葡萄球菌的检测，比目前普遍采用的先增菌再进行pcr检测的方法缩短了12～24h。实际检测了72份样品，同时与gb4789.10-94方法及两种快速检测致病性金黄色葡萄球菌检测方法做比较，pcr方法的检出率为72.2％，检出时间为6h,gb4789.10-94方法检出率为70.8%,检出时间为5d,prfilmrsa方法的检出率为61.1％,检出时间为18h,bairdparkerr.p.f方法的检出率为69.4％，检出时间为18h,结果表明fta滤膜用于pcr检测肉中金黄色葡萄球菌检出率高，耗时短。使用fta滤膜法制备模板dna,为食品中的致病菌快速检测构建了一个技术平台。