低双乙酰抗老化啤酒酵母工程菌的构建

用来源于啤酒酵母的γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶基因（gsh1）和铜抗性基因（cup1）取代质粒plz-2中α-乙酰乳酸合成酶基因（ilv2）内部约2.3kb的dna片段，构建成重组质粒picg。限制酶酶切质粒picg后获得在基因gsh1和cup1两端含有ilv2序列的6.0kb的dna片段。用此片段转化啤酒酵母ysf31，得到铜抗性高的转化子。并通过pcr和α-乙酰乳酸合成酶（ahas）活性测定筛选到酵母工程菌。小试实验结果表明酵母工程菌谷胱甘肽含量比受体高34％，而双乙酰含量是受体的75％。其他发酵指标并没有发生改变。中试实验表明酵母工程菌发酵周期缩短3d，而且成品啤酒的保鲜时间延长50％。由于dna操作过程中没有外源基因介入，因此啤酒酵母工程菌为生物安全的自克隆菌株，具有重要的实际应用价值。