毕赤酵母表达的hbv全长pres蛋白的分离纯化

巴斯德-毕赤酵母工程菌株gs115-pres经发酵在甲醇诱导下可高效表达分泌型全长pres蛋白。westernblot证明发酵液中存在着可溶性的分子量为48kd的pres蛋白和蛋白质颗粒，蛋白质颗粒主要成分为48kd的全长pres蛋白和28kd的s蛋白，电镜观察发现蛋白质颗粒直径为30nm。发酵液经过脱盐、浓缩处理后，上清液经deaesff阴离子交换柱得到纯化的pres蛋白；超速离心和蔗糖密度梯度离心得到蛋白颗粒。该颗粒的主要组分为全长pres蛋白（pres1＋pres2＋s），还有少量的主蛋白（s）。elisa检测证明全长pres蛋白和蛋白颗粒有着良好的抗原性，p/n显示蛋白颗粒的抗原性比pres蛋白的抗原性高。