重组人骨形态发生蛋白2在cho细胞中的表达、鉴定及活性分析

构建真核表达载体pcdna3.1(+)-hbmp-2，与质粒psv2-dhfr共转染cho-dhfr-细胞,以含有700μg/mlg418的imdm进行选择性培养，筛选抗性克隆，并用mtx扩增，提高rhbmp-2的表达量。收集的rhbmp-2蛋白进行westernblot检测，还原蛋白样品电泳产生一条大小约为18kd的特异性条带，非还原蛋白样品电泳产生一条大小约为30kd的特异性条带，提示表达的rhbmp-2是经过糖基化修饰的，且以同源二聚体形式分泌表达。单细胞分离培养得到14株rcho(hbmp-2)单克隆细胞株，elisa法检测rhbmp-2表达水平，最高可达7.83μg/24h/106cells。活性分析结果表明，表达的rhbmp-2具有很强的生物学活性。