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生物工程学报 2006
人巨细胞病毒pp150蛋白片段与mdbp蛋白片段的融合表达及初步应用Keywords: 人巨细胞病毒,融合蛋白,原核表达,western,blot,蛋白芯片 Abstract: 人巨细胞病毒(hcmv)感染是临床上常见的一种病毒性传播疾病,正常人群常无明显的临床症状,而对器官移植患者、免疫力低下及孕妇等人可产生严重的危害。以hcmvad169病毒株基因为模板,经pcr扩增了编码pp150蛋白片段的ul32基因和编码mdbp蛋白片段的ul57基因,目的基因转化入pmd18_t克隆载体后再经酶切与表达载体pet_11a连接构建出融合基因表达载体,然后转入大肠杆菌bl21,重组大肠杆菌经诱导表达融合蛋白pp150/mdbp。经sdspage分析,其相对分子量约为27kd,表达量约占菌体蛋白的17.45%,westernblot鉴定为阳性,elisa及蛋白芯片检测表明融合蛋白具有良好的抗原性,经过初步应用表明其对血清igg及igm的检出率与全抗原相比一致,具有进一步开发应用的价值。
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