单纯疱疹病毒2gd-hsp70融合蛋白基因的构建及表达

构建并原核表达hsp70-hsv2gd融合蛋白。将hsp70和hsv-2gd蛋白基因分别克隆到原核表达载体pgex-4t-1，构建成重组质粒pgex-4t-hsp70-gd,并测序鉴定。重组质粒pgex-4t-hsp70-gd转化大肠杆菌dh5α后,iptg诱导表达并进行sds-page分析。表达产物纯化后做westernblot检测。将其肌注免疫balb/c小鼠,检测融合蛋白对免疫小鼠脾淋巴细胞增殖、γ-干扰素产生以及血清中gdigg水平的影响。表达产物的sds_page分析发现，在相对分子量为118kd处有外源蛋白表达，与预期蛋白带一致。用gst柱得到了纯化的hsp70-hsv2gd融合蛋白。westernblot证实，表达产物具有良好的活性。gst-hsp70-gd组蛋白疫苗免疫的小鼠，其脾淋巴细胞刺激指数和脾淋巴细胞培养上清中γ-干扰素的水平高于其它组（p<0.05）。血清单纯疱疹病毒-2gd蛋白的抗体水平高于其它组（p<0.05）。