柑橘衰退病毒多克隆和单克隆抗体的制备及检测效果分析

通过改进提纯方法获得了柑橘衰退病毒（citrustristezavirus，ctv）的提纯液，其产量为1mg/100g植物组织。用ctv免疫大耳白兔，获得多克隆抗体，间接elisa效价为1∶25600。用ctv免疫小鼠，经细胞融合、elisa筛选和克隆化培养，获得18株能稳定分泌抗ctv单克隆抗体的杂交瘤单细胞株。对其中4株单克隆腹水抗体进行分析的结果表明，这些抗体的elisa效价为1∶51200～1∶204800，其中2g和3h的抗体类型及亚类为igg2a，1e和4h为igg2b。用所制备抗体对不同来源柑橘样品的ctv检测结果显示，单克隆和多克隆抗体结合使用，采用三抗体夹心elisa（taselisa）可以获得理想的检测效果，其特异性强、灵敏度高。同时发现所分析4株单克隆抗体对不同的ctv分离物鉴别能力存在差异，但有关这些ctv分离物的特性及其血清学关系还需进一步研究。