来源于pyrococcusfuriosus的耐高温α-淀粉酶基因在衣藻叶绿体中的表达

来源于pyrococcusfuriosus的耐高温α-淀粉酶是一种重要的酒精工业用酶，在植物中表达耐高温α-淀粉酶可以大大降低用植物秸秆生产酒精的成本。选择衣藻叶绿体基因组同源片段clpp-trnl-petb-chll-rpl23-rpl2和壮观霉素抗性基因，构建了来源于pyrococcusfuriosus的耐高温α-淀粉酶基因的衣藻叶绿体表达载体p64a。通过基因枪将其导入衣藻叶绿体中，经壮观霉素抗性(100mg/l)筛选，获得了9个抗性衣藻转化子。转化子经过抗性继代筛选后，经pcr、southernblot检测分析及暗培养，证实耐高温α-淀粉酶基因已整合到衣藻叶绿体基因组中并得到表达。酶活性检测表明，转基因衣藻表达产物具有耐高温α-淀粉酶活性，每克鲜重衣藻最高达77.5u。实验结果证明在植物叶绿体中表达工业酶制剂是可行的。