鸡传染性支气管炎病毒中国流行株免疫原s1基因的分子克隆、序列分析及其dna免疫的初步研究*

对来源于我国华东地区的鸡传染性支气管炎病毒流行株qd免疫原sl基因cdna进行了克隆、序列分析和dna免疫的初步研究。rt—pcr扩增qd毒株的s1基因，将其5’和3’端分别进行分子修饰后插入克隆载体pucl8的bamhⅰ／hindⅲ位电，在大肠杆菌中实现了目的基因的克隆；利用英国ibv毒株sl全基因核酸探针与qd毒株s1基因的重组克隆质粒分子杂交后，采用haeⅲ，pvuⅱ和xbaⅰ等限制酶对此流行毒株s1基固cdna进行了酶切分析；在测定qd毒株s1基因5’端高变区核苷酸序列并以此与ibv　m41，h120，6／82及beaud等参考毒株序列对比分析的基础上，构建了qd株s1基因dna免疫表达质粒，肌肉注射免疫小鼠后，鸡胚病毒中和试验的结果表明，ibvs1基因dna免疫表达质粒能诱导小鼠产生病毒特异的中和抗体，具有良好的免疫原性，初步显示基因疫苗在鸡传染性支气管炎防治上应用前景。