电泳亲和色谱技术分离蛋白质*

亲和色谱利用亲和配体与目标组分间的特异性结合作用实现对目标组分的纯化，该分离方法分辨率高．在生物物质的分析和分离领域得到日益广泛的应用[1]。亲和色谱在分离过程每一步操作中，液相主体中的溶质分子必须经过一系列扩散过程才能进入到固定相颗粒孔内完成吸附或解吸等质量置换反应，被置换出的物质再由颗粒内扩散出固定相颗粒进入流动相。与质量置换反应过程相比，扩散过程由于速度较慢而常成为亲和色谱分离过程的速度控制步[2]。开发新型介质以强化扩散过程成为近年来色谱分离技术研究的热点，典型成果有灌注色谱介质(perfllsionclnromatogr；tph>r)13，引。基于制备电泳技术方面的研究成果[5.6]，我们提出将多通道流动电泳与亲和色谱相结合形成一种新型制备规模的生物分离技术即电泳亲和色谱技术，其基本思想是利用电场强化扩散过程以加速分离过程的进行。我们的前期工作已证明该方法的可行性[7]。本文以人血清清蛋白(humanseguigtalbllmm．以下简称has)和bluesepharose6fktf10wⅲ介质(以下简称blue介质)为例，通过实验系统地考察电流强度对电泳亲和吸附和电泳洗脱过程的影响，并用电泳亲和色谱的方法纯化has。