缺失突变法研究尿激酶——单链抗体融合基因在大肠杆菌中的高表达
Keywords: 大肠杆菌,高表达,缺失突变体,稀有密码子,pcr定位诱变
Abstract:
对抗人纤维蛋白二聚体单链抗体与scu-pa-32k融合基因的表达质粒进行内切酶切割、拼接和外切酶bal31消化,得到了该融合基因的一系列缺失突变体,通过对这些突变体表达情况的研究,将影响表达的关键因素定位于基因的841~851位,可能对应于两个连排的大肠杆菌稀有密码子agg(精氨酸),用pcr定位诱变法把这两个agg均改造成cgt后,融合蛋白的表达量从改造前的2%~3%提高到了约30%。
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