新城疫病毒f蛋白中两段七肽重复序列的克隆和表达

从新城疫病毒(ndv)中国强毒株f48e9和弱毒株长春株f蛋白的cdna中亚克隆出两段七肽重复序列(heptadrepeatregion,hr1,hr2),将hr1和hr2分别插入表达载体pgex6p1,在大肠杆菌bl21(de3)中表达,将与载体中的gst(glutathionestrasferase)融合表达的可溶性融合蛋白用gst亲和层析柱纯化。纯化的融合蛋白用蛋白酶酶切后,先用gst亲和层析柱除去gst,再加热进一步纯化。纯化的hr1和hr2质谱分析其分子量,结果表明,强株的hr1和hr2的分子量分别为7103kd和6301kd,弱株的hr1和hr2的分子量分别为7107kd和6309kd,强弱株hr1和hr2的分子量都基本一致。本工作为研究hr1、hr2的结构以及它们在ndv与宿主细胞融合中的作用奠定了基础。