肝细胞靶向ph敏脂质体介导的硫代反义寡核苷酸对hcv5′ncr基因表达的抑制作用

反义寡核苷酸是一种阴离子大分子物质,细胞生物利用度较低且易被细胞溶酶体酶降解,为了增强反义药物在病变靶细胞内的有效浓度,根据受体介导的内吞作用原理,针对肝细胞专一性表达的去唾液酸糖蛋白受体,设计及制备了一种肝靶向性脂质体,这种脂质体同时具有ph敏性。采用竟争抑制实验及鸡红细胞溶血实验分析了其肝细胞靶向性及ph敏性;应用肝靶向ph敏脂质体作为药物运载工具,介导反义寡核苷酸hcv363作用于转基因细胞hepg2.9706细胞,通过荧光素酶活性检测,观察了硫代反义寡核苷酸对hcv5′ncr调控功能的抑制活性。结果显示,不同浓度半乳糖溶液对5%18gal脂质体有一定的抑制作用,浓度超过20mmoll时,达到饱和,最大抑制率为38%;溶血实验显示脂质体与红细胞膜融合作用有显著的ph值依赖性,ph<6时,血红素释放量明显增加;肝靶向ph敏性脂质体介导的hcv363对hepg2.9706细胞中hcv5′ncr调控基因具有显著的剂量依赖性抑制作用,浓度为10μmoll时,抑制率达86%。综上,所制备的脂质体具有一定的肝细胞靶向性及显著的p…