人三叶因子3在毕赤酵母中表达条件的研究

为提高人三叶因子3(humantrefoilfactor3,htff3)在毕赤酵母中的表达量,研究了转化子生长的培养条件,包括不同碳源对转化子生长的影响和接种量、甲醇浓度、ph值、摇瓶转速及不同诱导时间对人三叶因子3表达的影响。结果表明转化子在生长阶段加入葡萄糖生长旺盛,培养14h后od600就可达到50。在100ml生长培养基上的菌液以1∶1接入诱导培养基时蛋白表达量最高;转化子在1%的甲醇、ph60、摇瓶转速240r/min的条件下诱导48h,菌体密度od600为15,目的蛋白表达量达到20mgl。用5l发酵罐进行了高密度发酵,经2%甲醇32h诱导,最终菌体密度od600达到120,每升发酵液中含目的蛋白100mg。