人基质金属蛋白酶-2的表达、纯化和性质鉴定

pcr方法扩增人基质金属蛋白酶2(mmp2)不含信号肽的表达序列,酶切和测序鉴定正确后,构建酵母重组表达质粒ppic9mmp2,电击法转化毕赤酵母(pichiapastoris)细胞得到阳性克隆,甲醇诱导获得含大量基质金属蛋白酶2的培养上清,经sephacryls200纯化后,纯度达到电泳纯。明胶酶谱和sdspage分析说明重组mmp2能够降解明胶和iv型胶原,表明重组蛋白具有与天然mmp2相似的底物特异性。糖基化分析和sdspage表明,表达产物的分子量约为50kd,重组mmp2的c末段可能发生了降解。