人血管形成素在大肠杆菌中的融合表达、纯化及活性测定

rt-pcr获取的血管形成素angiogenincdna片段，克隆入融合表达载体prsetb中，表达产物为n端融合了his6的融合蛋白，以包涵体形式存在，占菌体总蛋白的10%。用8mol/l脲溶解包涵体，利用his6与过渡态金属离子ni+2高亲合力结合的性质，经ni+2nta亲和树脂一步法纯化，获得纯度达98%以上his6-ang融合蛋白，western-blot结果表明在相应分子量处有一条特异性条带。重组蛋白复性后活性测定表明，在体外可促进鸡胚绒毛尿囊膜(cam)血管形成，并可降解trna。