抗肿瘤血管三结构域单链抗体vh/l的构建与表达

以本室研制的一株抗肿瘤血管单克隆抗体aa98为基础，采用pcr扩增抗体aa98基因的重链可变区(vh)和轻链(l)，以重链恒定区1(ch1)5′端12个氨基酸的序列作为连接肽，并将连接肽中的lys突变为ser，构建vh连接肽-l三结构域单链抗体。重组vh/l单链抗体在大肠杆菌中得到了高效表达，其表达量占菌体总蛋白质的20%。表达的蛋白质在菌内形成包含体，经凝胶过滤法复性，获得了有抗原结合活性的vh/l。该三结构域单链抗体的成功构建和复性，为重组抗体片段的研制提供了借鉴。