丙型肝炎病毒基因组c区、ns3区、ns4区基因的融合、表达及初步应用

通过pcr技术从hcv全长基因组中扩增并克隆到core区、ns4区的部分优势表面抗原肽的基因和c33a基因。再将它们以core\,cc3c\,ns4的顺序和c33c、ns4的顺序分别拼接融合成融合抗原ccn、cn。片段之间以gly-gly-gly-gly柔性连接肽连接。经核苷酸序列分析表明，拼接点序列正确。将融合抗原cn、ccn基因分别克隆至t7启动子控制下的表达质粒pet24(a)+,pet22(b)+中，转化至大肠杆菌bl21(de3)后，经iptg诱导可高表达分子量约为43kd、58kd的融合抗原，表达产物以包涵体形式存在。表达产物经ni2+ida亲和柱纯化后，并对融合抗原cn、ccn的抗原性做了初步的鉴定。