真养产碱杆菌聚羟基烷酸合成酶基因在欧文氏菌中的表达

将含有真养产碱杆菌(alcaligeneseutrophus)合成聚羟基烷酸(pha)基因(phaca3)的质粒ptzl8u—phb改造成为具有卡那霉素抗性的质粒pjmcl．并以电击法将pjmcl引入利用碳源广泛的胡罗卜软腐欧文氏茵(erwiniacarotovora)非致病菌系(eccl3b)中，phacab可获得高效表达，膨大的转基因菌[eccl3b(pjmcl)]细胞内几乎充满pha颗粒。以蔗糖为碳源，初步在5l发酵罐中对转基因菌进行分批补料培养35h，菌体干重达28g／l,pha占菌体干重的68％，具有生产潜力。将该菌合成的pha提取纯化(纯度达99％)后，进行核磁共振分析，发现它只有单一的聚-β-羟基丁酸(phb)组分。