孤儿g蛋白偶联受体hgpcrc的亚细胞定位及组织分布

利用相关生物信息学软件,对从人结肠组织克隆所得某一孤儿g蛋白偶联受体(orphangprotein_coupledreceptors,ogpcrs)成员hgpcrc的氨基酸序列进行分析显示,hgpcrc对应的氨基酸序列组成了七个跨膜区段的结构域,具备gpcr的结构特征;然后,将hgpcrc之cdna与绿色荧光载体pegfp-n1构建gfp_hgpcrc表达载体,以空白质粒pegfp-n1作对照,转染cho-k1细胞,在激光扫描共聚焦显微镜下观察到空白质粒pegfp-n1转染的细胞表达了gfp并均匀分布于整个细胞,而gfp_hgpcrc转染的细胞观察到荧光清晰聚集于细胞膜和各细胞器质膜上,因而hgpcrc蛋白定位于膜上并稳定表达,与软件分析结果相一致;最后,以rt_pcr检测hgpcrc在20周龄胎儿重要组织器官及部分成人组织中的表达情况,结果显示hgpcrc在人心、肾、小脑及结肠等组织均有表达,但在肝、大脑、小肠及肌肉等组织里未检测到表达。该表达谱对于进一步认识hgpcrc在胚胎发育中的作用及生理功能提供了线索。