重组人载脂蛋白ai米兰突变体在大肠杆菌中的可溶性表达

载脂蛋白ai米兰突变体(apoliproteina-i-milano,aim)是载脂蛋白ai的天然突变体,具有比载脂蛋白ai更强的抗动脉粥样硬化症的作用。将aim基因n_末端的氨基酸密码子优化后,克隆至表达载体pet22b,重组质粒转化bl21(de3)宿主菌,用iptg诱导表达。aim以可溶形式表达,约占菌体总蛋白的38%。表达产物经butylsepharose4f.f疏水层析和qsepharoseh.p.阴离子交换层析后,再用vivaspin20(30000mw)进行超滤,aim单体的纯度达95%以上。aim单体与脂结合活性表明,aim单体结合脂的速度比apoa_i慢,但结合脂的量比apoa_i高。这项研究为aim的结构和功能,特别是临床应用研究奠定了基础。