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生物工程学报 2010
抗重金属汞离子抗体的制备及鉴定?, PP. 753-759 Keywords: 汞,螯合抗原,单克隆抗体,酶联免疫吸附法 Abstract: 汞、镉、铅等重金属引起的环境污染已在世界范围内造成危害。快速、廉价地监测生境中重金属是减小其对人类及动物危害的先决条件。传统检测方法无法满足高通量的现场检测,建立更快速、更经济的免疫分析法检测汞离子是生产及经济发展的需要。本研究中,报道了汞特异性单克隆抗体的制备与筛选方法和结果。因hg2+太小以至于不能引起免疫反应,所以用螯合剂(二乙烯三胺五乙酸,dtpa)将金属离子与载体蛋白(匙孔血蓝蛋白,klh)连接起来。成功合成、鉴定汞复合物抗原后,免疫balb/c小鼠,通过细胞融合获得了稳定分泌抗体的杂交瘤细胞。用极限稀释法亚克隆,通过elisa筛选,获得了2株稳定分泌抗汞离子抗体的细胞株(h2h5,h1h8)。小鼠腹腔注射1×107h2h5、h1h8细胞株制备腹水,腹水抗体效价都在1∶51200以上。经鉴定两株杂交瘤均为igg1亚类,轻链为kappa型且分泌抗体稳定性较好。实验结果为汞离子残留免疫学检测方法的建立提供了技术基础,对提高风险评估工作的效率和质量,保障食品安全有重要现实意义。
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