抗坏血酸、表皮生长因子和促卵泡素对绵羊卵巢皮质体外培养的影响

本研究旨在评估抗坏血酸(vc)、表皮生长因子(egf)、促卵泡素(fsh)对绵羊原始卵泡体外培养的影响以及它们之间的相互关系。实验按照2×2×2因子试验设计分为8组，分别为：mem(对照组)，mem+vc(50μg/ml)，mem+egf(100ng/ml)，mem+fsh(50ng/ml)，mem+vc+egf，mem+vc+fsh，mem+egf+fsh，mem+vc+egf+fsh。在培养0(未培养对照组)、2、6、12d后，对培养的卵巢皮质薄片进行组织学和增殖细胞核抗原(pcna)检测以及透射电镜(tem)观察。结果表明，与未培养组(发育卵泡比例15.4％±1.9％，正常卵泡比例88.2％±4.6％)比较，所有培养组中发育卵泡比例显著增加(p＜0.05)，正常卵泡比例下降(p＜0.05)。培养12d后，与对照组(卵泡直径(34.5±3.3)μm，卵泡存活比例(38.9％±3.9％))比较，mem+vc+fsh和mem+egf+fsh组中卵泡直径(分别为(39.7±3.4)μm和(42.5±5.1)μm)和卵泡存活比例(分别为58.5％±4.3％和59.3％±3.7％)都显著提高(p＜0.05)；各处理组中，培养12d后，mem+vc+egf组中发育卵泡比例(49.3％±3.2％)和卵泡直径((32.3±2.3)μm)最低，颗粒细胞pcna阳性卵泡比例(26.4％±1.2％)也最少，而mem+vc+egf+fsh组中卵泡存活率(59.7％±6.1％)和卵泡直径((42.5±5.1)μm)都显著增加(p＜0.05)，颗粒细胞pcna(43.5％±4.1％，p＜0.05)表达增加。电镜结果表明，vc+egf+fsh组能够维持与正常卵泡类似的超微结构，而在mem和mem+vc+egf组却显示不同程度的退化特征。本研究结果提示在培养中联合添加vc与egf抑制卵泡的发育和生长，而联合添加vc、egf和fsh可能是促进绵羊原始卵泡体外激活和生长，维持卵泡存活以及结构完整的最有效的处理手段之一。