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生物工程学报 2011
应用双质粒共表达体系提高融合蛋白ggh在毕赤酵母gs115中的表达量, PP. 983-989 Keywords: 融合蛋白ggh,双质粒,毕赤酵母,荧光定量pcr,western,blotting Abstract: 为实现人胰高血糖素样肽-1-人血清白蛋白融合蛋白((glp-1a2g)2-hsa，简称ggh)的规模化制备，通过ppiczαb与ppic9k双质粒共表达体系提高融合蛋白ggh在毕赤酵母中的表达量。首先运用pcr技术扩增出融合蛋白ggh的基因片段，构建了表达质粒ppiczαb-ggh，并电转至经载体ppic9k-ggh异位整合的ggh分泌型菌株——毕赤酵母gs115/f2；然后采用免疫学方法并结合高浓度抗生素筛选获得高产菌gs115/f3，在30℃，3％甲醇诱导80h后ggh的表达量达到了491m
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