h1亚型猪流感病毒抗体间接elisa检测方法的建立及其应用

为建立h1亚型猪流感病毒抗体检测方法，扩增了h1n1亚型猪流感病毒流行株的血凝素基因ha1部分，构建原核表达载体pet30a-ha1，并转化大肠杆菌bl21表达重组蛋白。对重组蛋白包涵体进行变性、复性和ni-nta亲和层析纯化。以纯化后的蛋白作包被抗原，建立间接elisa检测方法。利用该检测方法检测了2008?2009年采集的猪血清785份，阳性率为15.54％，不同省份的阳性率存在差异(8％~47％)。以idexx相关试剂盒检测结果作为参照，该方法的诊断特异性达到91％，诊断敏感性达到95％。