|
生物工程学报 2011
一种kbma炭疽疫苗候选株的研制, PP. 781-789 Keywords: uvrab基因,同源重组,cre-loxp系统,基因敲除,长波紫外光,8-mop,mts,代谢活性 Abstract: 炭疽病是由炭疽芽胞杆菌bacillusanthracis引起的一种人畜共患传染病,严重影响着人类的健康。近年来在细菌疫苗的研究中发现一种特殊的现象:细菌被杀死后,体内的代谢活性却仍然维持(killedbutmetabolicallyactive,kbma)。此发现为炭疽新型疫苗候选株的研制提供了新思路。先通过同源重组的方法,利用pmad质粒和cre-loxp重组酶系统完成对缺失两个毒性大质粒的炭疽芽胞杆菌减毒株ap422的uvrab基因的敲除,得到ap422△uvrab菌株,然后通过光化学处理(包括长波紫外光的照射和8-甲氧基补骨脂素处理),使炭疽芽胞杆菌ap422△uvrab失去繁殖能力。利用四氮唑化合物mts检测其代谢活性,表明光化学处理杀死后的炭疽芽胞杆菌ap422△uvrab在至少4h内维持一个很高的代谢活性水平,即具备典型的kbma特性。炭疽杆菌ap422△uvrab的kbma菌株的成功研制为我们提供了一种新型炭疽疫苗候选株。
|