埃博拉病毒np蛋白的单克隆抗体制备及抗原肽的定位

埃博拉病毒(ebolavirus，ebov)是一种能导致人类及脊椎动物出血热的致死性病毒，对公共卫生具有较严重的危害。ebov的np蛋白在病毒复制中具有重要作用，也是诊断该病重要的靶蛋白。文中原核表达重组扎伊尔型ebov的np蛋白，重组蛋白免疫bal/c小鼠，制备了一株小鼠抗ebov-np的单克隆抗体。利用westernblotting方法，该抗体能特异识别真核表达和原核表达的重组ebov-np，并能同莱斯顿型(restonebolavirus,rebov)、科特迪瓦型(cote-d’ivoireebolavirus,ciebov)和本迪布焦型(bundibugyoebolavirus,bebov)埃博拉病毒产生交叉反应，而不与苏丹型(thesudanebolavirus,sebov)和马堡型(themarburgvirus,marv)埃博拉病毒产生反应。利用突变pcr和westernblotting方法，定位了该抗体识别的抗原决定簇序列，该序列(pplesd)位于ebov-np蛋白的c端583-588aa。生物信息学研究表明，该序列在已经公布的zebov、ciebov、bebov共16个型和rebov的4个型中高度保守。研究结果为建立以上各型埃博拉病毒的检测方法提供了工具，也为研究埃博拉病毒复制及致病机理提供了基础。