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生物化学与生物物理进展 1996
人癌胚抗原单链抗体基因的构建和筛选Keywords: 聚合酶链反应,抗体可变区基因,重组噬菌体,癌胚抗原 Abstract: 从分泌抗癌胚抗原(carcinoembryoniantigen,cea)单抗的杂交瘤细胞株c50中提取总rna,逆转录成cdna,pcr扩增分别得到抗体轻、重链可变区基因,再利用两对pcr引物合成和扩增得到全单链抗体基因.将含轻、重链可变区序列的dna片段克隆于含噬菌体基因ⅲ的噬菌粒pcantab5.重组克隆在噬菌体表面表达基因ⅲ与单链抗体的融合蛋白.表达具抗原结合活性的单链抗体的重组噬菌体可以通过亲和筛选的方法筛选得到并富集.利用该方法我们可以从许多分泌不同抗体的杂交瘤细胞rna中快速克隆和筛选功能性抗体可变区基因.
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